Что означает копий 10 5 эпителиальных клеток

Количественное определение ДНК вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска

В лаборатории медицинского центра «Консультант» проводится новое исследование — «Количественное определение ДНК вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска (HPV ВКР) 16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,66,68 генотипов (16, 18 и 45 типы определяются отдельно) с выявлением вероятности интеграции вируса в геном человека».

Современные данные о взаимосвязи ВПЧ и рака шейки матки (РШМ)

Общая информация об ВПЧ высокого канцерогенного риска

Вирусы папилломы человека (ВПЧ) представляют собой широко распространённую и вариабельную группу вирусов, поражающих эпителий кожи и слизистых оболочек и обладающих онкогенным потенциалом. ВПЧ передаётся при тесном контакте с инфицированным эпителием, поэтому основные пути заражения – половой и контактно-бытовой. Возможна передача ВПЧ от инфицированной матери к плоду.

Инкубационный период может длиться от 2 месяцев до 2-10 лет.

Характерно скрытое течение заболевания, при котором отсутствуют клинические проявления. В 30 % случаев в течение 6-12 месяцев может произойти избавление от вируса. Диагностика скрытой ВПЧ-инфекции осуществляется только методом ПЦР.

ВПЧ может по-разному воздействовать на эпителий: способствовать возникновению доброкачественных образований (папиллом, кондилом) или объединению ДНК папиллома-вируса с геном клетки, что приводит к дисплазии (неоплазии) и в дальнейшем к раку (чаще всего в зоне трансформации).

По данным исследований количественное содержание вируса в материале коррелирует со степенью неоплазии: чем выше вирусная нагрузка, тем выраженнее цитологические изменения в эпителии.

При обследовании необходимо учитывать генотип вируса, наличие и степень цитологических и гистологических изменений в тканях, увеличение или снижение вирусной нагрузки через несколько месяцев (6 месяцев и более) после предыдущего обследования, оценить эффективность терапии в процессе лечения.

Показания к назначению теста:
— Первичный скрининг перед цитологическим исследованием.
— Первичный скрининг вместе с цитологическим исследованием для женщин старше 30 лет.
— Для ведения женщин с неопределенным результатом цитологии(ASC-USи ASC-H).
— Для разрешения дискордантных результатов цитологии и кольпоскопии.
— Для контроля эффективности терапии предраковой патологии шейки матки.
— При выявлении цитологических изменений в мазке на атипию.
— При кондиломах и других морфологических изменениях половых путей.

Что означают результаты?
Уровень вирусной нагрузки интерпретируется с учетом результатов цитологического исследования мазков, гистологических изменений в биоптате и генотипа вируса, изменении его количества с течением времени.
Количество ДНК ВПЧ не определяется при отсутствии вируса в исследуемом образце или его минимальном количестве. При этом риск развития патологического процесса, связанного с ВПЧ, минимальный.
— Клинически малозначимая концентрация вируса (менее 10 в третьей степени копий ДНК ВПЧ на 10 в пятой степени клеток) – минимальный риск развития дисплазии, транзиторное течение вирусного процесса.
— Клинически значимая концентрация вируса (более 10 в третьей степени копий ДНК ВПЧ на 10 в пятой степени клеток) – хроническая инфекция с высоким риском развития дисплазии и РШМ.
— Более 10 в пятой степени копий ДНК ВПЧ на 10 в пятой степени клеток при установленном факте персистентного течения инфекции (ВПЧ выявляется более 1 года) – усиленная вирусная нагрузка, ассоциированная с повышенным риском тяжелой дисплазии, часто встречается при РШМ.

Важные замечания
— Снижение вирусной нагрузки в 10 раз за 6 месяцев – транзиторная инфекция.
— Рост вирусной нагрузки через 6 и более месяцев после лечения указывает на возможность рецидива.
— Инфицирование ВПЧ не всегда приводит к раку шейки матки.
— Возможно одновременное заражение несколькими генотипами ВПЧ.
— Результат анализа должен интерпретироваться с учетом заключений цитологического и гистологического исследований и клинической картины.

Источник

Гинекологический мазок «на флору»: на что смотреть, и как понять

Большинству женщин мазок «на флору» знаком, как самый «простой» гинекологический анализ. Однако исследование куда «полезнее», чем может казаться. И всего несколько (а то и одно) отклонений способны подсветить значимые проблемы, еще до появления каких-либо симптомов. Так как же понять полученные результаты? Рассказываем по пунктам.

1. Эпителий

Как известно, любой живой объект в природе имеет ограниченный срок жизни, по истечении которого он погибает «от старости».

Эпителий в гинекологическом мазке – это и есть слущенные «старые» клетки слизистой оболочки влагалища, цервикального или уретры (в зависимости от оцениваемого локуса). Которые могут присутствовать в материале в умеренных количествах.

Превышение нормативных пределов («много» или «обильно») может указывать на:

Уменьшение или отсутствие эпителия в мазке – на атрофические изменения, недостаток эстрадиола или избыток андрогенов.

Кроме того, ввиду зависимости эпителия от уровня половых гормонов, его количество в материале может сильно меняться в зависимости от дня цикла, начиная с единичного «в поле зрения» в самом начале – до умеренного и даже большого количества ближе к овуляции и во время нее.

А появление в мазке так называемых «ключевых клеток» (эпителий, «облепленный» мелкими кокковыми бактериями) – является маркером бактериального вагиноза.

2. Лейкоциты

«Норма» лейкоцитов в мазке также сильно зависит от стадии цикла и уровня половых гормонов, а также исследуемого локуса.

Так, за «максимум» для:

Повышение показателя – очевидно, свидетельствует о воспалении, а полное отсутствие может иметь место в норме в самом начале цикла.

Слизь

Результат «отсутствует», «мало» или «умеренно» для этого показателя является нормой, что тоже связано с индивидуальными особенностями гормонального фона и циклом.

А вот «много» слизи в мазке – может свидетельствовать о том, что мазок взят в середине цикла, дисбиотических изменениях или избытке эстрогенов. Поэтому требует внимания специалиста или, как минимум, контроля в динамике.

Флора

Преобладающей флорой женских половых путей в норме у женщин репродуктивного возраста, как известно, являются лактобактерии (или палочки Дедерлейна). Количество которых может быть от умеренного до обильного, в том зависимости, в том числе, от фазы менструального цикла.

Патологические элементы

Присутствия мицелия грибов, трихомонад, диплококков (в том числе и возбудитель гонореи), лептотрикса, мобилункуса и прочих патогенных микроорганизмов в нормальном мазке не допускается, даже в минимальном количестве. А их выявление – серьезный повод незамедлительно обратиться за лечением.

Источник

ВПЧ 16/18/31/33/35/39/45/51/52/56/58/59 типа, ДНК (HPV, ПЦР, определение генотипа) соскоб, кол. в Ростове-на-Дону

В ходе анализа выявляется ДНК ВПЧ (вируса папилломы человека) и определяется его тип для оценки онкогенного риска.

Приём и исследование биоматериала

Комплексы с этим исследованием

Когда нужно сдавать анализ ВПЧ 16/18/31/33/35/39/45/51/52/56/58/59 типа, ДНК (HPV, ПЦР, определение генотипа) соскоб, кол.?

1. Скрининговое обследование сексуально-активных женщин;
2. Диагностика папилломавирусной инфекции.

Подробное описание исследования

Вирус папилломы человека – общее название группы вирусов, которые инфицируют человека и вызывают злокачественную трансформацию клеток, провоцируя развитие рака. Чаще всего они становятся причиной рака шейки матки и полового члена, реже – головы и шеи, прямой кишки, легкого.

К сегодняшнему дню известно около 100 типов этого вируса, 30 из которых наиболее вероятно вызывают рак. Эти типы ВПЧ называются онкогенными. Типы 16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59 считаются вариантами вируса наибольшего онкогенного риска, потому что наиболее часто вызывают рак шейки матки в случае инфицирования.

Для профилактики рака шейки матки практически все международные ассоциации в области охраны здоровья, в том числе ВОЗ (Всемирная Организация Здравоохранения) рекомендуют выявлять эти типы с помощью регулярных анализов.

ВПЧ передается половым путем и даже при орально-генитальном контакте. Реже возможно заражение при кожном контакте, если целостность кожных покровов нарушена – присутствуют царапины, ранки, ссадины.

Вирус папилломы человека очень заразен: даже при единичном половом контакте вероятность инфицирования около 80%. Из-за неполной сформированности слизистой оболочки полового тракта девушки, не достигшие половой зрелости, могут заразиться с большей вероятностью: вирусу легче проникнуть в клетки эпителиальной выстилки цервикального канала.
Папилломавирусом заражены больше человек, чем кажется. Большинство людей заражаются ВПЧ в течение жизни, но не заболевают: иммунная система успешно с ним справляется. Лишь у некоторых вирус проникает в клетки и размножается там, вызывая раковую трансформацию клеток.

Самый действенный способ профилактики рака шейки матки – регулярное тестирование (скрининг), даже если нет никаких симптомов. Лекарств от ВПЧ до сих пор не существует, поэтому заболевание лучше предотвратить, чем лечить. Для этого крайне эффективна вакцинация девочек до начала половой жизни, еще в детстве (с 5 лет).

Наибольший риск заражения ВПЧ имеют девушки, рано начавшие половую жизнь и часто меняющие половых партнеров. Повышают риск также другие сопутствующие ИППП (инфекции, передающиеся половым путем) и сниженный иммунитет, в том числе, из-за приема таких препаратов, как цитостатики и глюкокортикоиды.

Исследование проводится методом ПЦР в реальном времени. В ходе анализа определяются наличие вирусной ДНК и вирусная нагрузка (количество генетического материала) в образце. В результатах анализа представлены количественные значения для каждого типа.

Источник

«Мазок на флору»: о чём расскажет анализ?

Исследование «Мазок на флору» относится к микроскопическому виду анализа. Тест назначают при подозрении на инфекционный процесс репродуктивных органов.

Для проведения анализа необходимо получить мазок. У мужчин биотопом является уретра, у женщин — цервикальный канал, влагалище, уретра. Исходя из места локализации патологического процесса, врач может направить женщину сдать мазок только из влагалища или цервикального канала. Однако чаще требуются все три локуса сразу.

Взятие мазка — процедура безболезненная и безопасная. Все беременные женщины также сдают мазок минимум три раза: первый визит, 30 и 36 неделя, при условии нормально протекающей беременности. Полученный мазок переносится на стекло, высушивается и окрашивается, после чего врач-лаборант исследует препарат под микроскопом и описывает его. Бланк результата содержит информацию о микрофлоре, лейкоцитах, эпителиальных клетках и патологических агентах.

Микрофлора

В процессе анализа врач описывает её тип, обильность. В норме должна преобладать палочковая флора. Палочки являются представителями лактобактерий, поддерживают определенный уровень pH. Основная роль палочек — защита влагалища от болезнетворных микроорганизмов и стимулирование местных реакций иммунитета. Когда в мазке присутствует иные бактерии, например, кокковые, число палочек снижается. Такое состояние указывает на дисбиоз и требует обязательной коррекции.

Лейкоциты

Лейкоциты в мазке позволяют судить о наличии воспалительной реакции. Число лейкоцитов в графе «результаты» указывается через дефис. Первая и вторая цифры соответствуют минимальному и максимальному числу, обнаруженному в полях зрения микроскопа. Для каждого локуса есть свои референтные показатели. В цервикальном канале допустимо не больше 25 клеток в поле зрения, в уретре — не более 5, во влагалище — не более 10.

Увеличение абсолютного число лейкоцитов говорит о воспалении, поэтому необходимо получить консультацию гинеколога или уролога.

Эпителий

Эпителиальные клетки в препарате располагаются пластами или разрозненно в виде отдельных клеток. В мазке их число должно быть единичным. В случае увеличения количества клеток эпителия, врач указывает: умеренно — означает, что в одном поле зрения находятся до 10 эпителиальных клеток, много — до 20, обильно — свыше 25.

Изменение размера и морфологии клеток эпителия, могут косвенно говорить о воспалительной реакции или о проблемах гормонального характера. Клетки эпителия, покрытые по всей поверхности кокками, носят название «ключевых клеток». Обнаружение их в мазке является морфологическим критерием бактериального вагиноза.

Слизь

Значения «мало», «умеренно», «отсутствует» являются вариантом нормы. Если слизь присутствует в большем количестве, то это признак дисбиотических нарушений во влагалище.

Патологические элементы

В мазке врач может идентифицировать мицелий и споры дрожжеподобных грибков, трихомонады, актиномицетов, сперматозоиды и др. Но определить точную видовую принадлежность возбудителя не сможет из-за ограничений метода. Например, в урогенитальном тракте человека обитают несколько представителей рода Neisseriaceae, которые похожи между собой, поэтому отличить в стандартном микроскопе не представляется возможным.

Диагностическая чувствительность микроскопии при диагностике гонококковой инфекции в России составляет 30%, а трихомонадной инфекции — 44–68%. Микроскопия носит описательный характер, для точного определения вида возбудителя необходимо использовать молекулярно-биологические методы (ПЦР, NASBA) и культуральный метод.

Источник

Молекулярно-биологические методы диагностики ВПЧ-инфекции

Молекулярно-биологические методы предоставляют информацию о развитии ВПЧ-инфекции, но не позволяют судить о наличии заболевания, поскольку факт инфицирования ВПЧ не всегда сопряжен с заболеванием. Два основных метода диагностики ДНК ВПЧ — полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени и метод гибридного захвата (Digine-тест). Оба метода практически не отличаются по чувствительности и специфичности, однако, сертифицирован и одобрен FDA только Digene-тест.

Технология Digene-теста основана на гибридном захвате и заключается в уникальном способе связывания вирусной ДНК с РНК-зондом, захвате полученного гибрида моноклональными антителами и хемилюминисцентной детекции образуемых комплексов.

По сути это качественный тест, который применяется для профилактического скрининга для ранней диагностики патологии шейки матки. Тест идентифицует 13 генотипов высокого (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68) и 5 генотипов низкого риска (6, 11, 42, 43, 44).

Тест одобрен Федеральной службой РФ по надзору в сфере здравоохранения и социального развития (ФСНСЗСР). Digene-тест выявляет клинически значимый уровень инфицирования вирусом папилломы человека, который приводит к развитию неоплазии шейки матки. Положительный результат теста выдается в единицах Digine. Отрицательный тест практически исключает CIN II и CIN III.

Обнаружение ДНК ВПЧ в качественном формате

ДНК ВПЧ длительно сохраняется в образцах тканей, поэтому ее легко можно идентифицировать. Для определения достаточно минимального количества исследуемого образца. «Качественное» определение ДНК ВПЧ имеет спорную клиническую значимость, поскольку указывает только на факт наличия вируса, не позволяя сделать прогноз относительно течения инфекции. В большинстве случаев инфекция элиминируется самостоятельно.

Количественное определение вируса ВПЧ

Количественный анализ ДНК ВПЧ наиболее чувствителен на ранних этапах папилломавирусной инфекции, когда отсутствуют другие признаки инфицирования. Например, цитологические, клинические. Метод количественного определения используется в качестве скрининга, особенно в рамках национальных программ контроля рака шейки матки, а также для оценки эффективности терапии.

Количественные ПЦР-методы направлены на максимальную чувствительность выявления вирусной ДНК, однако, не всегда существуют прямые клинические корреляции.

Одним из критериев клинически значимой инфекции, которая с высокой степенью вероятности способна развиться в неоплазию, рассматривается вирусная нагрузка. Вирусная нагрузка 3 lg на 105 клеток является клинически малозначимой, поскольку сопровождается минимальным риском дисплазии и почти в 100% случаев заканчивается спонтанной регрессией. Вирусная нагрузка больше 5 lg на 105 клеток считается повышенной и сопряжена с высоким риском развития дисплазии. Снижение вирусной нагрузки на 1 lg за 6 месяцев говорит о транзиторной инфекции.

Прогностическая ценность вирусной нагрузки на сегодняшний день однозначно не определена.

Генотипирование вируса методом ПЦР позволяет определить тип вируса ВПЧ и его онкогенность. Этот метод подходит для выявления персистенции ВПЧ и позволяет отличить случаи реинфекции. О реинфицировании говорит изменение спектра генотипов, о персистентной инфекции — сохранение генотипа вируса через год после первого тестирования.

При инфицировании несколькими генотипами ВПЧ одновременно, прогноз течения заболевания менее благоприятный, а риск персистенции и риск развития РШМ по сравнению с инфицированием одним типом более высокий.

Выявление ВПЧ высокого риска свидетельствует о наличие папилломавирусной инфекции. ВПЧ высококанцерогенного риска имеют различный онкогенный потенциал. На долю самых опасных, 16 и 18, приходится около 70% всех случаев цервикального рака. Генотипирование на ВПЧ 16 и 18 позволяет выделить группу женщин, которые имеют повышенный риск развития цервикального рака.

Рекомендации ВОЗ по профилактике рака шейки матки

Источник