Что означает ложноположительный результат на коронавирус
Специалист лаборатории объяснила, почему ПЦР-тесты на коронавирус могут выдавать ошибку
Известно, что результаты ПЦР-теста на коронавирус могут быть как ложноположительными, так и ложноотрицательными. Заведующая лабораторией молекулярной диагностики «Инвитро» в Москве Наталья Гасилова объяснила «Доктору Питеру», какие причины могут повлиять на результат в процессе тестирования.
Ранее в Роспотребнадзоре озвучивали правила, которые необходимо соблюдать пациентам перед тестированием. К примеру, за несколько часов до взятия мазка не рекомендуется есть и пить, пользоваться спреями для горла и носа, а также чистить зубы и красить губы. Всё это, по словам специалистов, может повлиять на правильность результата. Заведующая московской лабораторией молекулярной диагностики «Инвитро» Наталья Гасилова назвала «Доктору Питеру» еще несколько причин, которые могут приводить к выдаче ложных результатов ПЦР-теста.
— Прежде всего, надо определиться с понятиями, — говорит Наталья Гасилова. — Ложноположительный результат — это когда пациент не инфицирован коронавирусом, но лаборатория выдала положительный результат теста на SARS-CoV-2 методом ПЦР. Ложноотрицательный — когда человек на самом деле инфицирован, но лаборатория выдает «-».
Как получают ложноположительные результаты?
Основная причина — так называемая кросс-контаминация, перекрестное загрязнение одного образца содержимым другого. Это может произойти на любом этапе тестирования — взятии мазка, транспортировки или уже в лаборатории.
— Как правило, источником кросс-контаминации служат образцы с большим содержанием РНК вируса в пробе. Тогда для загрязнения достаточно попадания капель или даже аэрозоля с этого образца, — говорит Наталья Гасилова. — Это может произойти в месте взятия мазка, при маркировке образца или пробирки, если медперсонал не меняет грязные перчатки. Есть также требование — оставлять зонд, которым берется биоматериал, в пробирке. Его полагается отламывать или отрезать ножницами. При выполнении этой операции тоже есть риск испачкать перчатки, поэтому их надо каждый раз менять.
По словам специалиста, загрязнение «чистого» образца может случиться и при транспортировке анализов.
— Например, если крышка пробы не плотно закрыта, биоматериал может «подтекать». В итоге пробирка снаружи будет контаминирована и, если потом пробирки ставятся в один штатив и перчатки не меняются, частицы вируса могут «переноситься» в другой образец. Еще такое бывает, когда в пробирке оставляются достаточно крупные зонды. В этом случае крышка микропробирки закрывается с усилием, может периодически приоткрываться, а вытекающие капельки биоматериала опять же попадают на стенку пробирки снаружи, — поясняет медик.
В лаборатории, кроме регулярной смены перчаток, важно аккуратно открывать пробирки — так, чтобы микроаэрозоль из одной пробирки не попал в другую.
— У каждой лаборатории есть алгоритм борьбы с кросс-контаминацией, по каким признакам ее определить и что делать. Самое сложное — контаминация продуктами амплификации или ампликонами (размножение фрагментов нуклеиновых кислот в исследовании ПЦР — Прим. ред.). По сути, это аварийная ситуация, которая требует проведения срочных мер в лаборатории. В этом исследовании ее риск минимален, поскольку пробирка после амплификации не открывается, и ампликоны во внешнюю среду не попадают.
Возможные причины ложноотрицательных результатов
По словам Натальи Гасиловой, здесь основная причина кроется в чувствительности тест-системы, которая применяется в конкретной лаборатории.
— Сейчас большинство производителей выпускают наборы с чувствительностью 1000 копий РНК вируса на 1 миллилитр (1х10*3). Она позволяет выявлять вирус как у бессимптомных и контактных в начале развития инфекции, так и в конце заболевания — уже на этапе выздоровления. Но если в образце количество вируса будет меньше порога чувствительности, то лаборатория выдаст ложноотрицательный результат, — поясняет эксперт.
Еще на результат влияет корректность взятия биоматериала со слизистой оболочки носо- и ротоглотки: к примеру, мазок взяли только из зева, а надо еще и из носа. Повлияет на него также малая вирусная нагрузка в биоматериале — когда тест выполняется в самом начале болезни или, наоборот, практически при выздоровлении, когда вирус уже уходит из организма.
Антитела к коронавирусу. Что важно знать.
Коронавирусная инфекция изменила жизнь почти всей планеты в целом и каждого из нас в частности. Инфекция часто протекает без симптомов или в лёгкой форме. Как узнать, переболел я или нет (ведь кашлял же зимой)? Являюсь ли безопасным для окружающих? Могу без страха навещать бабушку, маму, друзей? Эти и другие вопросы волнуют многих людей. Прошло достаточно времени чтобы появилась возможность ответить на них. Для оценки возможного иммунитета есть скрининговое исследование на антитела к коронавирусу (IgM и IgG).
Коронавирусная инфекция
Что такое антитела к коронавирусу?
Антитела, или иммуноглобулины – специальные белки, которые вырабатывает иммунная система в ответ на попадание любого инфекционного агента, в том числе CoV-2 в организм человека, даже если не было ярких признаков болезни. Антитела распознают коронавирус, обезвреживают и сохраняют информацию об инфекции на случай новой встречи с инфекцией.
Как образуются антитела?
На первой неделе заболевания начинают синтезироваться иммуноглобулины М (IgM). Они первыми встречаются с инфекцией, поэтому считаются маркерами острой первичной инфекции. Однако, тест на определение антител класса М может давать неспецифическую реакцию, что в ряде случаев приводит к ложноположительному результату. Поскольку на антитела класса М возложена ответственность первыми начать отражать инфекцию и сделать максимально быстро, то эти белки не очень специфичны и могут не очень точно улавливать вирус. К неспецифической реакции с тест- системой могут привести процессы, связанные с воспалением в организме: острые и хронические воспалительные процессы, аутоиммунные заболевания, проблемы с щитовидной железой, беременность и так далее. Это называется «ложноположительный» результат.
При стандартном инфекционном заболевании (в том числе и при коронавирусной инфекции) обычно антитела IgM через месяц исчезают, заменяясь на более специфичные антитела IgG. Однако учёные выяснили, что при коронавирусе IgM могут сохраняться длительное время (до 1,5-3 месяцев от появления симптомов, когда уже сам вирус давно не обнаруживается).
Иммуноглобулины А (IgA) также вырабатываются в острый период инфекции. Их основная цель – защитить слизистые оболочки от коронавируса. IgA более избирательны (специфичны), вырабатываются строго на коронавирус. Их уровень снижается после выздоровления, примерно к 1,5- 2 месяцам после инфицирования.
Иммуноглобулины G (IgG) синтезируются последними, через 5-6 недель с момента попадания вируса в организм, и сохраняют информацию о коронавирусе. Обычно IgG являются архивом памяти перенесеных инфекций, в большинстве случаев пожизненно, либо на несколько лет. Механизмы развития иммунной реакции на коронавирус пока изучаются. Неясно, стойкий иммунитет формируется или нет. Это предстоит узнать. Но в любом случае, выявление IgG свидетельствует о факте попадания коронавируса в организм и иммунном ответе организма.
Лаборатория KDL представляет линейку тестов на определение антител к новой коронавирусной инфекции.
Кому они показаны?
Также возможно анонимное выполнение исследование на антитела к коронавирусу с указанием возраста и пола.
Давайте о каждом исследовании по порядку.
Это комплексный тест, скрининговый. Одновременно определяет иммуноглобулины классов М и G, результат по каждому антителу. Выполняется иммунохроматографическим методом (ИХГА). Ответ выдаётся в формате «обнаружено/не обнаружено».
Как понимать результат исследования?
Если Ig M (+) обнаружены, IgG (-)не обнаружены:
Поэтому целесообразно провести исследование мазка из зева методом ПЦР. Если результат ПЦР отрицательный или нет признаков болезни, повторить тест на антитела через 2-3 недели.
Если IgM (+) обнаружены, IgG (+) обнаружены:
Если IgM (-) не обнаружены, IgG (+) обнаружены:
Если IgM (-) не обнаружены, IgG (-) не обнаружены:
Тест выполняется методом ИФА на анализаторе, производитель Евроиммун, Германия. Результат выдается в виде цифрового значения (коэффициент позитивности = КП).
IgA – показатели ранней инфекции, являются более точными в отличие от IgM, поскольку более специфичны.
Как правильно прочитать результат?
Положительный результат – более 1,1. Говорит об обнаружении IgA и может означать:
Пограничный результат – в интервале 0,8 – 1,1. Требует повторного исследования через 2 недели, поскольку может означать:
Отрицательный результат –менее 0,8. Означает отсутствие антител IgA, что возможно, если:
Исследование выполняется на анализаторе методом ИФА, производитель Евроиммун, Германия. Результат в виде цифрового значения (коэффициент позитивности = КП).
Расшифровка результатов:
Положительный результат –более 1,1. IgG выявлены, а это может быть в следующих случаях:
Пограничный результат –в интервале 0,8 – 1,1.
Возможно, IgG ещё немного, что требует повторить исследование через 2 недели и возможно, когда:
Отрицательный результат –менее 0,8.
IgG не обнаружены, что может быть, если:
Выполняется методом ИФА, методика автоматизированная, тест-системы российского производства. Заключение в виде цифры (коэффициент позитивности)
Выявление антител класса IgG говорит о наличии иммунного ответа на встречу с инфекцией в прошлом и является признаком перенесенного заболевания
Нужна ли специальная подготовка для определения антител к коронавирусу?
Подготовка не нужна. Для исследования сдаётся венозная кровь утром натощак или днём в часы работы медицинских офисов через 3 часа после еды. Чистую воду без газа пить можно.
Обращаю Ваше внимание, что все результаты исследований должен интерпретировать врач! Ведь полноценная картина складывается из данных истории болезни, осмотра, лабораторных и инструментальных данных. Будьте здоровы с лабораторией KDL, берегите себя и близких!
Россияне рассказали о пережитых испытаниях из-за ошибочных тестов на COVID-19
«Симптомы налицо, а ковида нет»
В Минздраве признали, что тест на коронавирус может показать ложноотрицательный результат примерно в 30-40% случаев. Главный пульмонолог министерства Сергей Авдеев еще в апреле приводил цифры исследования, согласно которым из 1400 пациентов у 300 был отрицательный лабораторный тест на COVID-19, однако результаты компьютерной томографии (КТ) легких показывали изменения, характерные для этого заболевания.
Похожие проблемы с тестами есть и в других странах. В США тоже типичны случаи ложноотрицательных тестов — их насчитывается около 30%, писала NYT. Схожие результаты исследований представляли и специалисты китайского университета Тунцзи — там в эксперименте приняли участие 1014 пациентов с коронавирусом, однако только у 59% из них тесты ПЦР показали положительный результат. У остальных же вирус выявили в ходе повторных тестирований.
При этом за то время, пока люди выясняют свой настоящий диагноз, они успевают заразить коронавирусом своих родственников и коллег. Подтверждающую этот факт историю «Газете.Ru» рассказала 22-летняя москвичка Любава, которой ложноотрицательный тест ее молодого человека стоил перенесенного заболевания.
«В один из вечеров у моего молодого человека резко поднялась температура, поэтому он решил не рисковать и сразу вызвал скорую помощь. Врачи сначала прописали ему обычные противовирусные препараты, а на следующий день приехали брать тест. Результат пришел через пару дней – отрицательный. Четыре дня на противовирусных, плюс постельный режим и парень встал на ноги, симптомов как ни бывало. Мы, конечно, сразу встретились – я пришла к нему в гости. Если бы я знала, чем это закончится, никогда бы не решилась на эту встречу», — вспоминает девушка.
Перед тем, как выйти на работу, молодой человек решил сделать тест повторно и был удивлен – он оказался положительным. В ответ на вопросы врачи лишь развели руками и попросили оставаться дома, попутно продолжая лечение. К вечеру того же дня хуже почувствовала себя и сама Любава.
«Тело ломило страшно, температура, боль в груди. Тест на ковид – положительный. Долгое лечение и изоляция, а все только из-за неверного первого теста», — вздыхает собеседница издания.
Долгое время не могли поставить диагноз и 32-летнему жителю Самары Евгению. По словам мужчины, он пролежал с температурой 39,5 несколько дней, а также полностью потерял обоняние, однако дважды получил уверенное резюме из лаборатории – результат теста отрицательный.
«Сильный сухой кашель, вкусов не чувствовал вообще, ломило все тело – слабость буквально подкосила и не давала даже без передышки походить по квартире. В первый же день вызвал скорую – взяли мазок, через три дня выдали отрицательный результат. Пожал плечами и продолжил попытки выкарабкаться», — рассказывает мужчина «Газете.Ru».
Еще через пару дней Евгений сделал КТ и также получил любопытный результат — в легких все чисто. Тест оказался отрицательным.
«Мучило непонимание ситуации – как так, все симптомы налицо, а ковида нет. По идее никакой самоизоляции я мог и не соблюдать. Но побоялся – у меня родители пожилые, зачем рисковать. И правильно сделал: третий тест дал положительный результат. Что было с предыдущими мазками, я так и не выяснил. Хотя я уже здоров, осадок остался», — смеется Евгений.
Буквально добиваться положительного результата теста на коронавирус пришлось и 40-летней жительнице Нижнего Новгорода Татьяне.
«У меня держалась невысокая температура – около 37,1 градусов. В былые времена не заметила бы и пошла на работу, а тут такой яркий симптом, как потеря вкуса и запаха. Пришлось вызвать врача, который взял мазок. Три мучительных дня в ожидании результатов и получите – тест отрицательный. Спокойно вышла на работу, даже к маме съездила, но самое интересное было еще впереди», — вспоминает женщина.
Еще через пару дней Татьяну убедили проверить результаты теста на КТ, так как вкусы и запахи к ней не возвращались. Итог — характерный симптом «матовое стекло» и поражение правого легкого до 30%.
«Больше всего обидно, что я инфекцию носила повсюду, может даже заразила кого-то. И кто теперь за это в ответе?», — задается она вопросом.
«Мне показалось, что анализ берут сомнительно»
В отдельных случаях тесты на коронавирус бывают и ложноположительными, что доставляет людям не меньше проблем. Так, провести в больнице две недели впустую пришлось 48-летней жительнице Ростова-на-Дону Виктории.
«Появились симптомы ОРВИ, сделала тест просто на всякий случай, а он взял и оказался положительным. Плюс на КТ нашли какое-то затемнение. Положили в больницу, вроде как даже витамины какие-то укололи. А на следующий день сделали повторный КТ, который вдруг оказался абсолютно чистым, — рассказала она «Газете.Ru».
— Следом за ним – новый тест. И он уже отрицательный. Врачи в смятении, я тоже. Но делать нечего – держали в стационаре две недели для профилактики и кололи витамины. Время просто вычеркнуто из жизни».
Отсидеть две недели на самоизоляции пришлось и жительнице Челябинска Ирине, которая сдала тест на коронавирус для профилактики и внезапно получила положительный результат. Никаких симптомов при этом она за собой не замечала.
«Когда я сдавала анализ, мне показалось, что анализ берут сомнительно. Так как я не видела, когда открывают стерильные палочки при мне, то бишь она (сотрудница лаборатории – «Газета.Ru») повернулась ко мне уже с открытыми палочками. Не дожидаясь результата, я пересдала анализ в другой лаборатории. И меньше чем через сутки, на следующий день с утра, мне приходит результат отрицательный», — пожаловалась женщина в редакцию местного портала 74.ru.
Тем не менее отстоять свою правоту и не садиться на 14-дневный карантин женщина так и не смогла. Вместе с ней на самоизоляцию также отправили мужа, ребенка и родителей.
«Никаких симптомов нет, температуры нет. Я прекрасно себя чувствую, — объясняла челябинка. — Я сдавала все анализы перед операцией. У меня идеальные анализы другие. Я COVID-19 сдаю не первый раз, просто в этой частной клинике я сдала в первый раз. И вышел такой ложноположительный результат».
Как спастись от ложноотрицательных тестов на ковид
Как объяснили «Газете.Ru» врачи, причин для ошибок в тестах может быть несколько.
«Тесты на коронавирус могут дать ложноотрицательные или отрицательные результаты. Например, если генетического материала в месте забора уже просто нет, то тест может быть просто отрицательный, никакого сбоя тут нет. Это происходит из-за того, что вирус в этом месте просто больше не размножается и уходит в другие органы – чаще всего это типично для тех, кто болеет уже около недели», — приводит пример врач-инфекционист Евгений Тимаков.
Существует и другая категория тестов – те, которые изначально берутся с нарушением техники. Именно их и стоит называть ложноотрицательными. В таком случае пациенту сразу же стоит попросить специалистов повторить забор материала, советует врач:
«Тут уже вина лежит на том, кто берет анализ – либо мазок был взят из носоглотки неглубоко, или неправильно был промыт зонд, которым был сделан сбор материала. Чтобы избежать этого, человек, который сдает тест, должен следить за тем, как берут сам анализ. Если зонд, можно сказать, «до мозга костей» доходит, то все нормально. Если просто поводили по щекам палочкой, то, желательно, попросить взять мазок повторно. Я лично просил это делать – отказать в этом случае не должны».
Более того, проверить результаты теста всегда можно при помощи других анализов. Делать это нужно строго под контролем врача, который сможет сопоставить данные симптомов и результаты анализов, считает терапевт Тина Петровская.
«В случае сомнений насчет результата теста может помочь, например, общий анализ крови: там обращаем внимание на лейкоциты, низкие они или нет. Так мы увидим, как минимум вирусная это инфекция или нет. Дальше мы можем взять анализы, которые сейчас включены в обследование по коронавирусной инфекции – это Д-димер, С-реактивный белок, некоторые биохимические показатели. Если что-то из них превышает норму, то мы можем с большей вероятностью сказать, что это все-таки ковид», — подсказывает Петровская.
Могут помочь и инструментальные методы исследования: например, компьютерная томография. Если она выявляет типичные для ковида симптомы, то сомнения в том, действительно ли человек болеет коронавирусом, должны исчезнуть.
«Дополнительная проверка поможет избежать таких ситуаций, когда из-за ложноотрицательных тестов люди решают, что они здоровы и отправляются, например, в гости, где распространяют инфекцию. Хотя даже в доковидные времена всех просили посидеть дома и не переносить болезнь на ногах, но сейчас почему-то все об этом забыли», — констатирует собеседница «Газеты.Ru».
Согласна с коллегой и терапевт-пульмонолог Марина Казакова. «Нужно всегда ориентироваться на симптомы и, желательно, изолироваться на нужное количество дней, чтобы избежать распространения инфекции», — предупреждает специалист.
В Минздраве сообщили, почему тест на COVID-19 может дать ложный результат
Согласно исследованию китайского университета Тунцзи, в котором приняли участие 1014 пациентов с коронавирусом, только у 59% из них тесты ПЦР показали положительный результат.
ПЦР-тесты – основной способ диагностики коронавирусной инфекции в России. Его суть заключается в лабораторном исследовании взятого у пациента биоматериала. По заявлению замдиректора НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора Александра Семенова, в стране делается около 100 тыс. тестов в день. Всего в РФ провели уже более 2,1 млн тестов.
Вместе с тем в России насчитывается до 30% ложных результатов анализов на коронавирусную инфекцию, сообщил ранее главный пульмонолог Минздрава Сергей Авдеев. «Чувствительность метода ПЦР — 70–80%. У нас есть пациенты с отрицательными результатами теста, но у них есть болезнь COVID-19», — подчеркнул медик в ходе конгресса «Человек и лекарство».
Авдеев объяснил «Газете.Ru», что неверные результаты тестов не зависят от их качества.
«Наши тесты имеют очень высокую точность. Здесь играют роль другие условия: то, каким образом был взят материал, и само по себе течение болезни»,
Так, результаты анализов зависят от того, на каких сроках они были сделаны, — по словам врача, чем раньше при появлении первых симптомов провести тест, тем больше шансов, что он даст сбой.
«С точки зрения других условий все зависит от места, из которого мы берем анализ — ротоглотка и нос дают абсолютно разные результаты. Из ротоглотки мы получаем больше ложноотрицательных тестов, из полости носа — меньше, из мокроты — еще меньше», — объяснил Авдеев «Газете.Ru».
Доктор медицинских наук, профессор РАН Александр Лукашев подтвердил, что неверные результаты тестов чаще всего зависят от места, откуда берется мазок. «Технически все тесты имеют на сегодняшний день достаточно высокую чувствительность и специфичность, близкую к 99%. Но, действительно, для пневмонии характерно, что вирус не размножается в ротоглотке, откуда обычно берут анализ», — заметил медик в разговоре с «Газетой.Ru».
По его словам, в связи с большой вероятностью ложных результатов диагноз «коронавирусная инфекция» начали ставить только на основании компьютерной томографии (КТ).
Сергей Авдеев также подчеркнул, что неверные результаты тестов не представляют опасности. «Мы понимаем сегодня, что для диагностики заболевания COVID-19 необходимо не только подтверждение из лаборатории, но еще и информация о других клинических исследованиях, к которым, например, относится КТ», — рассказал пульмонолог «Газете.Ru».
Какие ПЦР-тесты бывают?
Для сдачи ПЦР-анализов чаще всего используются две тест-системы, разработанные новосибирским Центром вирусологии и биотехнологии «Вектор». По данным Роспотребнадзора, Центр производит более 500 тыс. таких тест-систем в неделю и обеспечивает ими не только государственные лаборатории, но и некоторые частные.
Помимо «Вектора», свой тест разработали в Центре стратегического планирования и управления рисками Минздрава РФ. Его сотрудники сообщили, что заключили контракт на поставку 60 тест-систем в Центральную больницу Управделами президента России, а также планируют поставлять их в лабораторию «ИнВитро».
Еще один тест зарегистрировало Федеральное медико-биологическое агентство. Их система позволяет сократить время анализа до 90 минут, так как ее высокая чувствительность позволяет обнаружить даже низкие концентрации нуклеиновых кислот коронавируса.
«Практическая ценность невысока»
Помимо ПЦР-тестов существует еще один вид анализов – тесты на антитела. Они дают быстрый результат за счет обнаружения в крови пациентов веществ, демонстрирующих сильный иммунитет к коронавирусу.
Ранее замглавы НИИ эпидемиологии Семенов заявлял, что вскоре все желающие россияне смогут сдать такие анализы.
«В первую очередь тесты на антитела будут делать людям из групп риска: медработникам, пенсионерам и тем, кто контактировал с заболевшими», — подчеркнул он.
Сейчас же данный тест практически не применяется, так как его зарегистрировали только 6 апреля, пояснил Александр Лукашев «Газете.Ru». При этом он отметил, что, по его мнению, и в ближайшие месяцы не стоит ждать широкого распространения таких анализов.
«Этот тест выявляет вирус уже после того, как прошел пик заболевания. Поэтому сейчас, для предотвращения распространения COVID-19, он не имеет смысла, так как становится положительным слишком поздно.
Он даст результат, если человек заболел уже больше недели назад. Если человек заболел только сегодня и уже активно выделяет вирус, этот тест ничего не покажет», — сообщил врач.
Тем не менее, актуальным такой анализ может стать для тех, кто хочет узнать, переболел ли он коронавирусом бессимптомно. «Также это будет важно, когда мы будем искать стратегии выхода после эпидемии и решать, для кого карантин еще нужен, а для кого — нет», — пояснил Лукашев «Газете.Ru».
Сейчас тест на антитела имеет только научное знание — его практическая ценность невысока, убежден профессор. «Он не позволяет разорвать цепочку передачи вируса», — пояснил медик.
Результаты за 30 минут
В США же тесты на антитела к коронавирусу начали проводить уже 5 апреля. Ими занялся Американский центр по контролю и профилактике заболеваний, чтобы определить, сколько человек, включая бессимптомных пациентов, переболели COVID-19.
Как сообщают местные СМИ, проведение таких анализов сможет показать, как коронавирус ведет себя в разных условиях, а также поможет сориентировать власти по поводу принятия дальнейших ограничительных мер.
Что касается ПЦР-тестов, то и за рубежом статистика их достоверности не слишком позитивна. Так, согласно исследованию, проведенному в Китае, в городе Ухане, где впервые была зафиксирована вспышка коронавируса, точными оказались 71% тестов.
В то же время в Германии начинают использовать автоматизированный тест, разработанный компанией Bosch. Его точность оценивают в 95%. При этом анализы не нужно отправлять в лабораторию. Врачи берут мазок из носа или горла и наносят его на картридж, содержащий реагент. Каждый аппарат может давать результаты по 10 анализам за 24 часа.