Что показывает гистологическое исследование биопсийного материала
Гистологическое исследование
По данным Всемирной организации здравоохранения, ежегодно в мире диагностируют 10 млн новых случаев рака (в России – 0,5 млн). Важную роль в лечении занимает своевременность обращения к врачу и качество диагностических исследований. К наиболее важным и информативным методам диагностики рака относится гистология опухоли. Экспертное исследование в условиях лаборатории с новейшим оборудованием позволяет поставить точный, объективный диагноз и составить эффективную программу лечения.
Что представляет собой гистологическое исследование
Гистологическая диагностика обязательно входит в программу обследования пациентов с подозрением на онкологию перед операцией, химиотерапией, лучевой терапией. Данный вид исследования предполагает непосредственное изучение тканей новообразования для подтверждения или опровержения онкологического диагноза. Забор тканей осуществляют из внутренних органов и тканей пациента в очаге поражения. Затем биообразцы обрабатывают и изучают в лаборатории под микроскопом.
Метод дает возможность:
Его применяют при онкозаболеваниях органов ЖКТ, кожи и мягких тканей, молочной и щитовидной желез, органов грудной клетки, а также при онкоурологических, онкогинекологических болезнях.
Зачастую гистологические исследования тканей дополняют цитологической диагностикой, в ходе которой врачи изучают отклонения в структуре и функциях клеток. В ряде случаев для проведения цитологии достаточно взять мазок (например, с тканей матки), смыв или образец жидкости. Гистологический же метод связан с необходимостью забора биоматериала из внутренних органов.
В каких случаях проводят гистологическое исследование материала
Гистологию проводят в случаях, когда необходимо:
Заменить гистологическое исследование другими методами невозможно. Его могут назначать в комплексе с обзорной и контрастной рентгенографией, УЗИ с допплерографией, МРТ и КТ, эндоскопическим исследованием, радионуклидной диагностикой, а также лабораторными анализами.
Хотите мы вам перезвоним?
Методы гистологического исследования
Основной метод забора биоматериала из внутренних органов – биопсия. Ее проводят несколькими методами.
Специальной подготовки к гистологии не требуется. Забор биоматериала проводят натощак, чаще всего утром. Процедура проходит под местным наркозом, поэтому не вызывает болезненных ощущений. Если новообразование расположено в кожных покровах, достаточно седативных (успокаивающих) средств.
Все методы биопсии абсолютно безопасны для организма и связаны с минимальным травматизмом. Проводят процедуру под визуальным контролем врача посредством УЗИ, что исключает риск повредить органы.
Преимуществом биопсии является минимальное количество противопоказаний. К ним относят проблемы со свертываемостью крови, аллергическую реакцию на анестетики, сердечную недостаточность высокой степени тяжести. Женщинам не проводят процедуру в случаях, если она угрожает беременности.
Как проходит исследование
Лабораторное гистологическое исследование биопсийного материала проводят традиционным и ускоренным способом. Традиционно биоматериал проходит специальную обработку для сохранения формы. Его уплотняют и нарезают на пластины толщиной в несколько микронов для исследования под микроскопом. Результат можно получить в течение 7–10 дней.
Ускоренный способ применяют в случаях, когда биопсию проводят во время операции. Онкохирургу нужен результат исследования, чтобы определить – сохранять ткани или удалять их. В этом случае биообразец в течение 1 часа замораживают, разделяют и микроскопируют.
В онкологии применяют несколько видов микроскопирования:
В заключении специалист подробно описывает свойства всех видов тканей, которые были обнаружены в биообразце. Расшифровать результаты гистологии может только квалифицированный врач-онколог.
Возможны ли ошибки при исследовании?
Есть 4 основных условия, которые могут повлиять на результаты гистологии.
Если все условия соблюдены, то риск ошибки сводится к нулю.
Где пройти гистологическую диагностику
Данное исследование можно пройти в онкологическом центре «СМ-Клиника» в условиях стационара или амбулаторно.
Внимательные врачи детально разъяснят результаты исследования и предложат индивидуальную программу лечения. Записаться на прием можно на сайте или по телефону: +7 (495) 777-48-49
Что показывает гистологическое исследование биопсийного материала
Исследование фрагментов тканей, взятых во время диагностической процедуры или операции. Гистологическое исследование является самым важным в диагностике злокачественных опухолей, а также одним из методов определения стратегии лечения. Целью исследования является обнаружение отклонений от нормального строения тканей, выявление злокачественных клеток или их предшественников. При этом выдается гистологическое заключение с оценкой уровня дифференцировки или степени злокачественности опухоли. Также может быть исследован материал поджелудочной железы, материал солидного образования, материал кожного или подкожного образования, материал слюнных желез и др.
Гистология пунктата, гистология опухоли.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Общая информация об исследовании
Исследование проводится для уточнения или подтверждения ранее поставленного диагноза. Также помогает верно определить заболевание в спорных ситуациях, дает возможность на ранней стадии выявить наличие злокачественного образования, изучить динамику его роста (определить, есть ли разрастание, увеличение, распространение опухоли). Кроме того, с помощью него осуществляют дифференциальную диагностику патологических процессов и анализируют изменения, происходящие в ходе лечения в тканях. Это единственное «прямое» исследование, с помощью которого можно оценить морфологию ткани, выявить характер роста опухоли, степень инвазии, оно обладает высокой точностью благодаря непосредственному анализу фрагмента ткани (опухоли); позволяет определить стадию, прогноз и тактику лечения заболевания.
Гистологический метод исследования имеет высокую точность благодаря тому, что ткани пораженного органа изучаются под микроскопом, а не рассматриваются сквозь другие ткани и органы, как во время рентгена или УЗИ. Именно поэтому гистологический анализ считается наиболее важным для постановки итогового диагноза. Кроме этого, благодаря микроскопии и обязательному окрашиванию тканей пациента специалисты имеют возможность получить самые точные данные о текущем состоянии пораженного органа. С учетом утвержденных стандартов структуры тканей и внутренних органов в здоровом состоянии, врач может провести оценку патологических изменений и оперативно установить наличие заболевания, а также его степень.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
По результатам исследования выдается заключение. В нем может стоять ориентировочный или заключительный диагноз, в ряде случаев дается описательный ответ, позволяющий высказать лишь предположение о характере патологии (при недостаточности клинических сведений или материала).
Заключение содержит описание выявленных морфологических изменений и морфологический диагноз патологического процесса (заболевания). Гистологическое заключение дается в соответствии с гистологическими классификациями ВОЗ.
79 Иммуногистохимическое исследование клинического материала (с использованием 3 антител)
104 Иммуногистохимическое исследование клинического материала (с использованием 7 антител)
21 Определение HER2 статуса опухоли методом FISH
12 FISH – исследование для дифференциальной диагностики
Кто назначает исследование?
Гистология и биопсия в чем разница
Столкнувшись с серьезной проблемой со здоровьем, человек сталкивается с массой новых и непонятных для себя терминов. Это касается как самого диагноза, так и лабораторных исследований и потому многие термины и понятия путаются, принимаются за равнозначные.
Например, многие путают такие понятия как гистология и биопсия – в чем состоит разница между ними и поговорим далее. Прежде всего, стоит разобраться в терминах.
Гистологическое исследование.
Представленный метод исследования под микроскопом позволяет точно подтвердить/опровергнуть наличие или отсутствие патологических в организме клеток, злокачественных новообразований. Для проведения гистологии врачи выделяют такие способы забора биоматериала:
После подготовки – забранный образец исследуется под микроскопом и в этом отношении могут применяться такие оптические системы и приборы:
Помимо этого, существует и в арсенале врачей и экспресс – тестирование, которое применяется в условиях проведения операции. Данный метод диагностики применяют, если в процессе проведения оперативного вмешательства были обнаружены подозрительные для медиков новообразования. Именно для этого и применяют тестирование, позволяя поставить точный диагноз.
Биопсия и ее виды
Основное отличие такой процедуры как биопсия от гистологии состоит в том, что это не есть методом исследования, а исключительно способом забора биоматериала, соответственно резко разняться и ее виды.
Основными видами биопсии врачи выделяют:
Как видим различия между гистологией и биопсией существуют весомые, когда для гистологического исследования берут посредством проводимой биопсии биологический материал. Если просто забрать биоматериал и не исследовать его – ценности такая медицинская процедура не имеет никакой.
Что показывает гистологическое исследование биопсийного материала
Микроскопическое исследование тканей шейки матки и матки, используемое для диагностики доброкачественных заболеваний, предраковых состояний и онкологических заболеваний.
Гистология шейки матки, гистология эндометрия, гистология матки, биопсия эндометрия, биопсия шейки матки, диагностическое выскабливание, раздельный диагностический кюретаж.
Синонимы английские
Medical Diagnostic curettage, separate diagnostic curettage, WFD, histopathological examination of biopsies, cervical biopsy, Endocervical curettage (ECC), Colposcopy Biopsy Procedure (CBP).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Гистологическое исследование является одним из самых эффективных и современных методов диагностики гинекологических заболеваний. Оно играет особенно ценную роль при предраковых и онкологических заболеваниях, позволяя поставить верифицированный диагноз и назначить адекватную терапию.
В большинстве случаев ткань для анализа получают путем раздельного выскабливания (кюретажа) стенок шеечного канала и полости матки или путем аспирационной биопсии.
Кольпоскопия проводится для выявления рака шейки матки и изменений, которые могут привести к нему. Чаще всего она назначается, если выявлены отклонения от нормы во время гинекологического осмотра (например, генитальные бородавки, цервицит), при измененном или атипичном мазке Папаниколау (Рар-тест), при кровотечении после полового акта. Кольпоскопия может использоваться для отслеживания вируса папилломы человека (ВПЧ) и для поиска атипичных изменений, которые могут возникнуть после лечения.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
По представленному материалу выдается макро- и микроскопическое описание материала и заключение. Гистологическая картина может быть различной в зависимости от локализации и вида патологического процесса. Отсутствие клеточных изменений трактуется как норма.
Признаками, указывающими на присутствие патологии, являются:
Признаками патологии беременности, выявленными при гистологическом исследовании, являются:
Патологические изменения интерпретируются по соответствующей заболеванию классификационной схеме. Только врач может правильно расшифровать результаты гистологического исследования, учитывая все данные о пациенте и его историю заболевания.
Что может влиять на результат?
29 Цитологическое исследование аспирата из полости матки
Как проводится гистологическое исследование: виды, методы, особенности
Злокачественные новообразования — это группа заболеваний, насчитывающая несколько тысяч видов опухолей разных типов и разной степени злокачественности. Они подразделяются на большие группы в зависимости от того из каких тканей они развиваются: если из эпителиальных (барьерных) — то это раки, если из соединительных тканей (мягких тканей и костей) – саркомы, если из лимфоидных (иммунных) – лимфомы/лейкозы. От того насколько правильно верифицирована опухоль (определен ее тип, степень злокачественности и другие характеристики) зависит правильность и эффективность лечения. Важную роль в этом играют гистологические исследования.
О том, как проходят гистологические исследования, какие задачи кроме диагностических они позволяют решать, что влияет на сроки их выполнения рассказывает заведующая патологоанатомическим отделением с прозектурой НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова, к.м.н. Анна Сергеевна Артемьева.
Что служит материалом для патоморфологических (гистологических) исследований?
Процесс получения фрагмента ткани (биоптата) — биопсия – это несколько разных способов забора материала для гистологического исследования.
Биопсию внутренних органов делают под УЗИ-навигацией, либо с помощью хирургического вмешательства.
Как обрабатывают эти материалы для проведения гистологического исследования?
1 Этап. Фиксация — «консервирование» биоптата в формалине — специальном химическом растворе, который предотвращает гниение, позволяет сохранить структуры ткани.
Фиксация биоптата может занимать от 6 до 24 часов – в зависимости от его вида и размера.
Операционный материал фиксируется дольше, в несколько этапов. Сначала предварительная фиксация, которая занимает примерно 12 часов. Затем вырезка нужных фрагментов и повторная фиксация еще 24 часа.
Соотношение объема материала к объему формалина должно быть 1:20.
2 Этап. Процессинг — процесс обезвоживания, обезжиривания и пропитки материала парафином. Автомат перемещает кусочек материала из раствора в раствор.
В качестве растворов применяются: абсолютированный изопропиловый спирт (6-8 смен), ксилол (2 смены), расплавленный парафин (2 смены).
Программа разнится для «жирного» материала (к которым относятся, например, ткани молочной железы) и «нежирного» – 36 и 24 часа соответственно.
Процесс получения парафиновых блоков.
3 Этап. Изготовление парафинового блока. Кусок материала помещается в форму с расплавленным парафином (уже другим нежели во время процессинга – с более высокой температурой плавления) и охлаждается. Выполняется вручную, сложно ускорить.
4 Этап. Изготовление срезов. Толщина образца — кусочка ткани, залитого в парафин – 1-3 мм. Толщина каждого среза 4-5 мкм (0,004-0,005 мм). Выполняет лаборант с использованием специального инструмента – микротома.
Срезы монтируются на стекла и должны высохнуть.
Несмотря на то, что часть материала теряется при выравнивании в микротоме, при должном профессионализме, из одного образца — материала от одной биопсии, операционного материала от одной опухоли, возможно изготовить около 100 стекол (микропрепаратов).
Для чего делаются срезы?
Срезы делаются для рутинной окраски гематоксилинном и эозином, иммуногистохимического исследования и других видов исследований.
Срезы для всех исследований используются одинаковые, различается окраска, могут отличаться стекла, на которые они монтируются, так для ИГХ и FISH нужны специальные адгезивные стекла или заряженные стекла.
Блоки и стекла способны храниться долгие годы и использоваться для проведения дополнительных гистологических исследований, пересмотров, а также в научных целях.
Архив гистологических материалов собирается в НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова с 1927 года и содержит более 10 млн единиц хранения (микропрепараты — стекла, парафиновые блоки, архивные карточки, влажный архив).
Какие виды гистологических исследований наиболее информативны?
Что позволяют определить разные виды гистологических исследований
Гистологическое исследование – что это такое?
Позволяет верифицировать опухоль – то есть определить из каких клеток она состоит (из какой ткани она развивается), степень ее дифференцировки (зрелости).
Рутинная окраска, выполняющаяся при гистологическом исследовании, позволяет выявить патологический процесс в анализируемом материале (биоптате, операционном материале):
Также, в большинстве случаев, благодаря рутинной окраске, можно определить степень злокачественности опухоли и, если она достаточно зрелая, то какова ее природа.
Окрашенные срезы под микроскопом
 |
Инвазивный протоковый рак er 100%.
Карцинома сигмовидной кишки.
Крупноклеточная нейроэндокринная опухоль.
МТС крупноклеточной нейроэндокринной опухоли.
Неспецифический рак молочной железы. Участок in situ карциномы внутри протока, криброзного типа.
Низкодифферинцированный рак пищевода.
При гистологическом исследовании биоптата и операционного материала можно оценить распространенность: размер опухоли и прорастание в окружающие ткани, насколько затронуты лимфоузлы и есть ли метастазы в отдаленные органы (если эти все структуры присланы для гистологического исследования). При консультации готовых микропрепаратов – стекол, это, как правило, невозможно, если опухоль больше размеров гистологической кассеты или рассечена предыдущим исследователем и не предоставлены данные макроскопического исследования.
Во время гистологического исследования изучаются все стекла от одного образца – материала, полученного от одного вмешательства — одной операции или одной биопсии, вне зависимости от их количества, это считается одной консультацией.
Сроки выполнения гистологического исследования зависят от количества микропрепаратов и от категории сложности того процесса, который в них обнаруживается, сроки могут удлиняться, особенно при необходимости использования дополнительных методов исследования и анализа дополнительных сведений. На сроки выполнения гистологического исследования влияет полнота предоставленной пациентом клинической информации, в том числе данных уже проведенных исследований.
Иммуногистохимия (ИГХ)
Сложное многоэтапное исследование, выполняется после гистологического исследования на том же материале. Опухолевые срезы окрашиваются антителами, которые способны связываться антигенами (белками), которые несут опухолевые клетки. Разные опухолевые клетки несут разные антигены, к каждому из которых подобно ключа к замку подходит антитело.
Один из этапов ИГХ
ИГХ исследование — это комбинаторика. 100% специфичных и чувствительных к какой-то опухоли маркеров не существует, но есть набор антигенов, которые в определенном типе опухоль должны быть и набор тех, которых там быть не должно, таким образом ИГХ-панель строится так чтобы включать несколько антител, которые должны быть позитивны и несколько, которые должны быть негативны. Для разных опухолей различаются эти наборы позитивных/негативных маркеров.
При проведении прогностической ИГХ – выявлении маркеров чувствительности к терапии определяется набор таких маркеров для конкретных опухолей, например, рака молочной железы: рецепторы стероидных гормонов (эстроген, прогестерон), рецептор эпидермального фактора роста (HER2) и индекс пролиферативной активности Ki67 (скорости деления клеток).
Стекла окрашиваются последовательно — различными антителами красятся наборы маркеров в несколько этапов, процесс окраски стекол одним антителом занимает 48 часов.
Таким образом, каждое антитело наносится на отдельный срез ткани, монтированный на отдельное стекло, как правило с соответствующим внешним контролем, количество реакций (используемых антител) и этапов окраски может существенно варьировать в зависимости от конкретной диагностической ситуации, все зависит от индивидуальных особенностей опухоли. Проводится такое количество окрасок, которое необходимо для того, чтобы выявить наиболее характерный для определенной опухоли набор позитивных и негативных маркеров.
Кому-то для этого будет достаточно 5 антител, а кому-то необходимо сделать 20 окрасок и более. Максимальное количество окрасок, которое нам приходилось делать – 212.
Поэтому точные сроки и стоимость этого исследования невозможно определить заранее. Разные по течению и прогнозу опухоли могут быть очень похожи друг на друга, только минимальные различия в окрашивании, с учетом клинических данных и данных других методов обследования, могут позволить установить верный диагноз.
Есть целый ряд доброкачественных опухолей, симулирующих злокачественные, в том числе высокоагрессивные, а некоторые злокачественные высоко дифференцированные опухоли трудно отличить от воспалительных и реактивных процессов. В таких ситуациях только опыт и квалификация патоморфолога, анализ всего комплекса доступной информации (снимки КТ, МРТ, рентген, протокол операции, и др.) позволяют поставить диагноз.
В грамотной интерпретации результатов ИГХ очень важна роль эксперта, ведь те случаи, с которыми приходится работать, в большинстве своем, сложные. Практически не существует антител, которые могут выступать в качестве 100%-х маркеров той или иной опухоли, врачу всегда приходится взвешивать различные вероятности.
Что определяется с помощью ИГХ?
Иммуногистохимия позволяет оценить потенциальный темп роста опухоли, ответ на химио-, таргетную, гормональную терапию.
Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH-тест)
Это метод молекулярно-генетической диагностики в ткани.
FISH проводится в срезе ткани и позволяет привязать генетическую перестройку к конкретной опухолевой клетке.
В этом тесте также используются специальные красители, которые связываются только с определенными участками хромосом. Их называют зондами, которые могут быть помечены флуоресцентным или хромогенным красителем, визуализирующимися при помощи флуоресцентного или светового микроскопа.
Технические операции по подготовке гистологических стекол к этому исследованию занимает 2 рабочих дня.
Анализ препарата с помощью многоголового микроскопа.
Полученные микропрепараты очень чувствительны к внешней среде – они могут выцвести со временем, чтобы избежать потерь информации все FISH-препараты сканируются, создается их цифровая копия, которая доступна для внешнего пересмотра. Специалисты просматривают флуоресцирующий материал в темном поле, в анализе препарата принимают участие как минимум 2 специалиста. При необходимости используется и цифровой анализ.
Что определяется с помощью FISH-теста?
FISH-тест позволят диагностировать некоторые виды опухолей, определяет целесообразность использования некоторых химиотерапевтических препаратов.
Проведение гистологического исследования, и в первую очередь FISH-теста — это экспертная работа, которая зависит от квалификации специалиста. Очень многие мутации, которые выявляются в опухолях, не всегда являются метками опухолей, они могут находиться и в доброкачественных образованиях или нормальных тканях.
За год патологоанатомическое отделение НМИЦ онкологии имени Н.Н. Петрова выполняет около 20000 гистологических исследований (пациентов), из них около 5000 консультативных случаев (пересмотров), более 30000 ИГХ исследований, а также участвует в программе внешнего контроля качества ИГХ исследований NordIQ.
Специалисты отделения обладают огромным опытом проведения гистологических исследований и экспертными компетенциями.
Скорость выполнения гистологических исследований и адекватность гистологического заключения зависят от ряда факторов:
После выполнения гистологического исследования пациент получает гистологическое заключение/протокол исследования гистологического материала.
Расшифровка гистологического исследования: на что обратить внимание?
Гистологическое заключение включает в себя несколько рубрик (полей):
Макроскопическое описание
Заполняется как для биоптатов — не обязательно, так и для операционного материала, для которого имеет крайне важное значение в ряде случаев.
Микроскопическое описание
Описание изменений на микроскопическом уровне, не обязательно к заполнению, так как вся необходимая информация может быть отражена в поле «заключение».
Результаты иммуногистохимического исследования
В этом поле описано какие антитела использовались в данном случае и каков результат окрашивания: наличие окрашивание или его отсутствие, локализация в клетке при необходимости, а также процент позитивных клеток и интенсивность реакции, когда это имеет значение.
Патологоанатомическое заключение
Содержит нозологическую/классификационную единицу, если ее возможно установить по исследованному материалу, то есть дает ответы на вопросы:
Также приводятся все необходимые прогностические данные: степень дифференцировки, параметры, влияющие на стадию, состояние краев резекции, если возможно их оценить и т.п.
Дополнительные замечания и рекомендации
Поле может содержать комментарии, относительно возможного направления дальнейшего обследования, вероятности того или иного диагноза, необходимости ознакомиться с теми или иными клиническими данными и др.
Мы не рекомендуем пациентам самостоятельно заниматься расшифровкой показателей гистологического исследования, используя информацию, полученную на различных Интернет-сайтах и форумах пациентов, так как на интерпретацию данных влияет большое количество факторов, в том числе, возраст пациента, данные других исследований и др.
Расшифровкой исследования может заниматься только специалист – врач онколог по профилю заболевания!
Авторская публикация:
АРТЕМЬЕВА АННА СЕРГЕЕВНА
заведующий патологоанатомического отделения с прозектурой ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, кандидат медицинских наук